EZsep™AL-N固相萃取柱應用于果汁中乙酰磺胺酸鉀的檢測

前言

國家市場監督管理總局，國家衛生健康委員會發布即將實施的食品中乙酰磺胺酸鉀的測定方法，該標準適用于乳及乳制品，冷凍飲品、水果制品、蔬菜制品、食用菌和藻類、豆類制品、堅果與籽類、糖果、糧食制品、焙烤食品、調味品、飲料、酒類、果凍中乙酰磺胺酸鉀的測定。

本實驗參考標準《GB 5009.140-2023 食品安全國家標準 食品中乙酰磺胺酸鉀的測定》，使用EZsep™AL-N固相萃取柱進行樣品凈化，高效液相色譜進行檢測，建立了一種對果汁中乙酰磺胺酸鉀的分析方法。

1、實驗過程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀，島津企業管理（中國）有限公司；

MPREP-SPE08手動固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學儀器廠；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

乙腈（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

硫酸銨（分析純），購自國藥集團化學試劑有限公司。

水中安賽蜜溶液標準物質，1000μg/mL，壇墨質檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取水中安賽蜜標準溶液0.1mL，用水稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的色素混標中間液。

分別移取10μg/mL的色素混標中間液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5用水稀釋至1.0mL容量瓶中，得到濃度分別為0.1、0.2、0.5、1、2、5μg/mL的標準工作溶液。

1.3 實驗部分

準確稱取果汁試樣5.0g，置于50mL具塞離心管中，先加入20mL水，渦旋1min,超聲提取20min，10000r/min離心5min，上清液轉移至50mL容量瓶中，再向離心管中加水20mL，混勻后超聲5min并離心。合并上清液,用水定容至刻度，混勻。準確吸取提取液5mL，作為待凈化液，待凈化。

將EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，分別以10mL乙腈、10mL水活化后，取待凈化液上樣，收集流出液。分別用2mL甲醇-乙腈-硫酸銨溶液(5+10+85)洗脫液洗滌固相萃取柱2次，收集流出液，合并3次流出液，并用洗脫液定容至10mL，混勻，用PTFE微孔濾膜過濾，高效液相色譜測定。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：A:0.02mol/L硫酸銨溶液 B:甲醇；

流速：1.0mL/min；

檢測波長：227nm；

進樣量：10μL。

表1 流動相梯度洗脫表

2、       實驗結果

表2 加標回收率結果

圖1 乙酰磺胺酸鉀標準色譜

圖2 樣品空白標準色譜

圖3 樣品加標色譜圖

3、結論

本次實驗使用EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司，對肉果汁中乙酰磺胺酸鉀進行測定，其加標回收率范圍在89.4%~100.3%之間，RSD為4.7%。準確性和精密度均滿足GB 5009.140-2023要求，且實驗方法穩定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.140-2023 食品安全國家標準 食品中乙酰磺胺酸鉀的測定